Trombotsüütide funktsiooni uuringud

Trombotsüütide funktsiooni uuringud

(B-Agr-RISTOhigh, B-Agr-RISTOlow, B-Agr-TRAP,

B-Agr-ASPI, B-Agr-ADP)

Põhja-Eesti regionaalhaigla laboratooriumi hematoloogia labor
Telefonid: 617 1393

Üldiseloomustus

ASPItest reagent sisaldab arahhidoonhapet (ArA), mis on trombotsüüdi ensüümi tsüklooksügenaasi (COX) substraadiks. COX muudab ArA tromboksaan A2-ks (TXA2), mis on tugev trombotsüüdi aktivaator. Kui COX on blokeeritud (nt aspiriini või NSAID ravi korral), siis TXA2 moodustumist ei toimu ja trombotsüütide agregatsioon on madal või puudub täielikult.

ADP aktiveerib trombotsüüti ADP-retseptorite, eriti P2Y12 kaudu. Klopidogreel, prasugreel ja tiklopidiin on selle retseptori otsesed antagonistid. Nende ravimite doseerimise muutmise kaudu on võimalik juhtida trombotsüütide agregatsiooni.
Trombiini retseptorit aktiveeriv peptiid (TRAP-6) on tugev trombotsüütide aktivaator, mis stimuleerib trombotsüütide agregatsiooni. Trombiini ja TRAP-6 aktiveeritud trombotsüüte blokeerivad GpIIb/IIIa antagonistid (Aggrastat® ja Integrillin®).

Ristotsetiin on mikroobivastane aine, mis moodustab kompleksi von Willebrandi faktoriga (vWF). Kompleksis muutub VWF nii, et seondub trombotsüüdi GpIb retseptoriga ja aktiveerib trombotsüütide agregatsiooni. VWF seondumist GpIb retseptoriga pärsib aspiriin. Ristotsetiin on kasutusel kahes kontsentratsioonis. Kontsentratsioonid on valitud nii, et trombotsüüdid ei agregeeru või agregeeruvad ainult nõrgalt madalas kontsentratsioonis (0,2 mg/ml) ristotsetiiniga aktiveerides, kuid agregeeruvad hästi kõrges kontsentratsioonis (0,77 mg/ml) ristotsetiiniga aktiveerides.

Vastust väljendatakse trombotsüütide agregatsiooni kõvera aluse pindala ühikuga (U). Mida suurem on väärtus, seda tugevam trombotsüütide agregatsioon.

Näidustused

• von Willebrandi haiguse, Bernard-Soulier sündroomi diferentsiaaldiagnostika – B-Agr-RISTOhigh, B-Agr-RISTOlow, B-Agr-TRAP
• Trombotsüütide-vastase ravi personaalne jälgimine, ravimresistentsuse diagnoosimine
  • Aspiriin: B-Agr-ASPI , B-Agr-TRAP
  • Klopidogreel, Tikagreloor:  B-ADP, B-Agr-TRAP
  • GpIIb/IIIa antagonistid (Aggrastat®, Integrillin®):B-Agr-TRAP,   B-Agr -ADP, B-Agr-ASPI
• Sõeluuring Glanzmanni trombasteeniale (pärilik või omandatud GpIIb/IIIa restseptorite defekt): B-Agr-RISTOhigh, B-Agr-TRAP,   B-Agr -ADP, B-Agr-ASPI

Referentsvahemik    

B-Agr-RISTOhigh        98-180 U

B-Agr-RISTOlow          0-20 U

B-Agr-ADP                53-140 U, terapeutiline väärtus <30 U (3)

B-Agr-ASPI               86-162 U, terapeutiline väärtus <30 U (4)

B-Agr-TRAP              97-182 U, terapeutiline väärtus <30 U (4)

Kliiniline tõlgendus

• Trombotsütopeenia ning trombotsütoosi korral on agregomeetria tulemused ebausaldusväärsed.
• Tuleb arvestada, et testide tulemusi võivad mõjutada:
  • mõned toiduained/toitained: Omega-3, kalamaksaõli, kohv, küüslauk, ingver, kiivi, kakao ja tume šokolaad
  • mõned ravimid, nt. antidepressandid, antibiootikumid, südameravimid, allergiavastased preparaadid, mittesteroidsed põletikuvastased ravimid
  • protseduurid: ekstrakorporaalne membraanoksügenatsioon (ECMO), kardiopulmonaalne tehisverevarustus (cardiopulmonary bypass)

Trombotsüütide agregatsioon arahhidoonhappe toimel (B-Agr- ASPI)

Aspiriinravi korral viitab terapeutilisest väärtusest kõrgem tulemus trombotsüütide mittetäielikule inhibeerimisele ja ravimi vähenenud toimele (patsient ei võta ravimit, imendumishäired või suurenenud trombotsüütide käive (turn-over) organismis. See võib  suurendada arteriaalse trombemboolia riski. Test on mõjutatud COX-i inhibeerimisest, GPIIb/IIIa retseptori vastastest ravimitest ja GPIIb/IIIa retseptorite defitsiidist.

• Test on tundlik: aspirin, NSAID, GP IIb/IIIa antagonistid (Aggrastat®, Integrillin®), Glanzmanni trombasteenia
• Test ei ole tundlik: Klopidogreel, tikagreloor, VWD

Trombotsüütide agregatsioon adenosiinfosfaadi toimel (B-Agr- ADP)

Ravi korral P2Y₁₂-retseptori antagonistidega (klopidogreel, prasugreel, tiklopidiin) viitab terapeutilisest väärtusest kõrgem tulemus trombotsüütide mittetäielikule inhibeerimisele ja ravimi vähenenud toimele (patsient ei võta ravimit, imendumishäired või suurenenud trombotsüütide käive (turn-over) organismis. See võib suurenendada arteriaalse trombemboolia riski.

• Test on tundlik: Klopidogreel, Tikagreloor, GP IIb/IIIa antagonistid (Aggrastat®, Integrillin®), Glanzmanni trombasteenia
• Test ei ole tundlik: Aspiriin, VWD

Trombotsüütide agregatsioon trombiini retseptorit aktiveeriva peptiidi toimel (B-Agr-TRAP)

Ravi korral GpIIb/IIIa antagonistidega viitab terapeutilisest väärtusest kõrgem tulemus trombotsüütide mittetäielikule inhibeerimisele ja ravimi vähenenud toimele. See võib suurendada arteriaalse trombemboolia riski.

• Test on tundlik: GP IIb/IIIa antagonistid (Aggrastat®, Integrillin®), Glanzmanni trombasteenia
• Test ei ole tundlik: Aspiriin, Klopidogreel, Tikagreloor, VWD

Trombotsüütide agregatsioon ristotsetiini toimel (B-Agr- Risto) - vt ka von Willebrandi haiguse (VWD) diagnostiline algoritm.

B-Agr-RISTOlow testi kõrged tulemused võivad viidata von Willebrandi haiguse 2B tüübile või pseudo-von Willebrandi haigusele (platelet-type).

B-Agr-RISTOhigh testi tulemused on vähenenud juhtudel kui trombotsüütide agregatsioon puudub täielikult või on vähenenud von Willebrandi haiguse puhul, esineb GpIb retseptori puudulikkus (Bernard-Soulier sündroom).

• Test on tundlik: mõõdukas ning raske VWD, Bernard-Soulier sündroom, aspiriin
• Test ei ei ole tundlik: Glanzmanni trombasteenia, GP IIb/IIIa antagonistid (Reopro®, Aggrastat®, Integrillin®), kerge VWD

Patsiendi ettevalmistus:       

• Baasagregatsiooni hindamiseks peab patsient olema vähemalt 1 nädal ilma aspiriini, NSAID jt ravimiteta. See nõue ei kehti patsientide puhul, kellel uuring teostatakse ravi personaalseks jälgimiseks.

Kirjandus

1. Gresele P, Bury L, Mezzasoma AM, Falcinelli E. Platelet function assays in diagnosis: an update. Expert Rev Hematol. 2019 Jan;12(1):29-46.
2. Calatzis A, Loreth R, Spannagl M. Multiplate platelet function analysis -
   application and interpretation. 2007.
3.  Bolliger D, Lance MD, Siegemund M. Point-of-Care Platelet Function monitoring: Implications for Patients With Platelet Inhibitors in Cardiac Surgery. Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia 2020;88:1-11.
4.  Multiplate® analyzer. Cut-off-values ADP test and ASPItest. Roche Diagnostics International Ltd 2013.

Koostanud    

Marika Pikta, kliinilise keemia ja hematoloogia osakonna vanemarst

Karel Tomberg, vanemarst-arendusjuht

12.10.2020